一、实验室检查
依靠病原学和血清学确诊。用电镜或免疫电镜从患者的粪便中检测出病毒粒子，或者用ELISA和RIA法从粪便中检测出病毒抗原。ELISA、RIA法也可以检测患者血清中的特异性抗体，特别是IgM抗体。
二、特异性诊断实验
1、取粪直接或免疫镜检查，可发现轮状病毒颗粒。
2、用酶联免疫附带试验或免疫酶斑试验(Immnnoenzymedotest)检测粪便上清液中的病毒抗原，具有较高的敏感性和特异性。
3、从粪便中提取病毒RNA，进行聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染色，检查有无轮状病毒的RNA电泳图谱，既有诊断价值，又可区别不同型病毒感染。
4、血清学检测，感染后5天，血中可检测出特异性IgM抗体，亦有助于本病诊断。
